体液常规细胞形态学检验诊断现状与展望

            周道银老师简介:医院实验诊断科主任技师,研究员,全国形态学诊断学术交流群专家组成员。中华医学检验杂志编委会和中华医学会检验分会形态学检验诊断高级培训班专家。从事临床检验诊断学工作三十余年。专业特长为体液、血液及骨髓细胞形态学检验诊断,尤其是在浆膜腔积液细胞形态学诊断方面独具特色。具有扎实的基础理论知识和丰富的临床实践经验,多年来对胸液、腹液、心包液、尿液、脑脊液、肺泡灌洗液、痰液及其他体液常规检验的积累与改进,形成了体液常规检验细胞形态学诊断技术系列。建立的瑞吉染色细胞形态学诊断分级判断及细胞化学染色技术,为良性疾病(细菌、真菌、寄生虫感染)与恶性疾病(实体瘤、淋巴瘤、白血病)的鉴别与诊断提供了有效的依据。    

一、体液常规形态学检查概述

形态学检查价值

?形态学检验是检验学科最基本的技能,是临床实验室诊断最简便、最特异和最实用的常规检验方法和检验内容。?形态学检验是某些疾病诊断的“金指标”,是判断疾病疗效和预后的重要依据。?形态学检验诊断对临床诊断疾病具有参考诊断、鉴别诊断、确定诊断价值。体液常规形态学检查含义◆体液细胞是指除血液以外的各种体液及其体液中的各种细胞,包括脱落于体液中的细胞。◆各种体液,如胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液等,在完成一般性常规检验的基础上,将标本离心,取沉渣制成涂片,经瑞吉染色后,在显微镜下进行细胞形态学观察,出具检验诊断报告(细胞分类、肿瘤细胞、狼疮细胞、噬菌细胞、真菌、寄生虫和结晶等)。◆该检查称之为体液常规(细胞)形态学检查。它是集基础理论、临床知识、实验方法、涂片染色、实践经验于一体的综合技术。检查目的是提高检验质量,提升常规形态学检验应用价值。体液标本种类胸液、腹液、心包液、脑脊液、痰液、胃液、十二指肠液、胆囊液、胰液、羊水、精液、前列腺液、泪液、唾液、耳道分泌物、鼻腔分泌物、乳腺分泌物、阴道分泌物、尿道分泌物、肿块/囊肿液、脓肿液、引流液、关节腔积液、阴囊积液、肺泡灌洗液、腹膜透析液、胸腔冲洗液、腹/盆腔冲洗液、尿液、粪便等三十余种。体液常规形态学检验内容·理化检验·细胞形态学细胞计数细胞分类及形态观察·病原生物及其它形态观察真菌、细菌、寄生虫、结晶等临床实验室与病理科功能定位◆医疗机构临床实验室是指对取自人体的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学等检验,为临床提供医学检验服务并出具检验报告的实验室。摘自《医疗机构临床实验室管理办法》卫医发[]73号◆医疗机构病理科是对取自人体的各种器官、组织、细胞、体液及分泌物等标本,通过大体和显微镜观察,运用免疫组织化学、分子生物学、特殊染色以及电子显微镜等技术进行分析,结合病人的临床资料,做出疾病的病理诊断。摘自《病理科建设与管理指南(试行)》卫办医政发〔〕31号怎样理解检验诊断◆国家赋予检验医学的学科名称《临床检验诊断学()》。◆临床实验室(检验科)出具的检验报告即检验诊断报告,为临床诊断疾病提供依据。◆检验诊断报告对临床诊断疾病具有参考诊断、鉴别诊断、确定诊断价值。体液形态学检查的法规依据·《医疗机构临床实验室管理办法》(卫生部卫医发[]73号)·《医疗机构临床检验项目目录》(国卫医发[]9号)·《全国临床检验操作规程》(卫计委第四版[])·《医学实验室质量和能力专用要求》(GB/T-/ISO:)·《医学实验室质量和能力认可准则》(CNAS-CL02/ISO:)·《医学实验室质量和能力认可准则在体液学检验领域的应用说明》(CNAS-CL41)体液形态学检验能否筛查肿瘤细胞·年版《医疗机构临床检验项目目录》共包括检验项目项临床体液、血液专业项,临床化学检验专业项,临床免疫、血清学专业项,临床微生物学专业项,临床分子生物学及细胞遗传学专业项。·《医疗机构临床检验项目目录》临床体液、血液专业胸腹水常规检查胸腹水细胞学检查脑脊液常规检查脑脊液细胞学检查各种穿刺液及分泌物细胞学检查·《全国临床检验操作规程》(第四版,3)P粪便检查乙状结肠癌、直肠癌患者的血性粪便涂片染色可见到成堆的癌细胞。P脑脊液检验染色分类法:脑脊液找到癌细胞是临床确诊脑膜癌的重要手段。P痰液检验肿瘤细胞见于原发性或转移性肺癌。P支气管肺泡灌洗液检验检查癌细胞有利于肺部肿瘤的诊断。P浆膜腔积液检验瑞吉染色分类。HE或巴氏染色找癌细胞。P精液检验精液中出现癌细胞可为生殖系统恶性肿瘤的诊断提供依据。P前列腺液检验前列腺癌时可见癌细胞。体液恶性肿瘤细胞分级报告?未查见恶性细胞?查见核异质细胞?查见可疑恶性细胞?查见恶性细胞恶性细胞若能确定是上皮源性的,则报告癌细胞;若能分型,则进一步报告为腺癌细胞。恶性细胞若能确定是造血淋巴组织源性的,则报告白血病细胞、淋巴瘤细胞。二、体液常规形态学检验诊断现状现状◆60家医院浆膜腔积液常规形态学检查现状调查?标本采集86.7%为非抗凝标本?沉淀物制片68%为涂抹法制片,20%为推片法制片?染色方法88.33%采用瑞氏或瑞吉复合染色◆细胞分类及报告?涂片瑞吉染色88.33%?有核细胞分类88.33%?不报告恶性细胞81.67%?直接分类(单核、多核细胞)11.67%?凝固标本不检验85%调查结果◆调查结果表明:标本采集、沉淀物制片、涂片染色查找肿瘤细胞、凝固标本处置等存在的问题比较突出。原因分析与对策◆原因质量意识不强、操作不规范、专业基本功不扎实等◆对策增强责任意识、服务意识、质量意识,加强形态学专业人才培养。对于凝固标本不做细胞计数,但应把凝块细胞挤出,离心制片染色,作细胞分类及形态学观察。现状◆体液常规形态学检查越来越广泛的得到应用,医院,甚至到社区、医院。◆涂片瑞吉染色为多数检验技术人员所接受、采用。◆常规形态学图文报告部分地区已广泛应用,医院。◆体液常规形态学检验诊断为临床诊断疾病发挥了重要作用,其诊断价值不可替代。三、体液常规形态学检验诊断展望体液形态学检查的MICM◆MICM是应用于血液系统白血病诊断分型的综合性检查。体液形态学检验诊断完全可以借助MICM检查,赋予新的检验内涵,用于恶性肿瘤和良性疾病的诊断与鉴别诊断。Morphology(形态学)?细胞学涂片?冰冻切片?石蜡切片?TCT制片染色方法:瑞吉染色、HE染色、巴氏染色Immunology(免疫学)?流式细胞术体液T淋巴细胞亚群分析用于诊断白血病、淋巴瘤体液HLA-B27的检测辅助诊断强直性脊柱炎体液定量分析肿瘤细胞DNA倍体?免疫细胞化学体液细胞免疫化学染色,用于各种肿瘤细胞的鉴定(T、B细胞,肿瘤标记)?肿瘤标志物浆膜腔积液肿瘤标志物检测,用于恶性肿瘤的辅助诊断Cytogenetics(细胞遗传学)?染色体检查体液细胞染色体及核型分析体液恶性细胞常见多二倍体、超二倍体、亚二倍体、假二倍体、内复制和标志染色体?FISH(荧光原位杂交检测)1.HER-2/neu基因、TOP2A基因检测用于乳腺癌,指导其临床用药及预后判断。2.TERC基因检测,有助于宫颈癌筛查和早期诊断。3.p16基因检测用于诊断膀胱癌及术后复发。4.EGFR基因扩增用于指导非小细胞肺癌患者临床用药。5.ERG基因断裂重组用于前列腺癌的早期诊断及判断预后Molecularbiology(分子生物学)?基因检测PCR结核杆菌DNA检测、巨细胞病毒DNA、EB病毒DNA?Exosomes(外泌体)胸腔积液exosomes的蛋白组学分析,用于恶性肿瘤的诊断?DNA定量/倍体分析尿液、胰液、浆膜积液、胆管液等的DNA倍体分析,用于恶性肿瘤的诊断DNA自动细胞分析检测仪体液形态学检验诊断自动化、标准化国内临床血液体液专业规范性引用文件·WS/T-《临床血液学检验常规项目分析质量要求》·WS/T-《血细胞分析的校正指南》·WS/T-《血浆凝固实验血液标本的采集及处理指南》·WS/T-《临床化学设备线性评价指南》·WS/T-《血细胞分析参考区间》·ECLM:《欧洲尿液分析指南》·CLSIGP16-A3:《尿液分析》·CLSIH26-A2:《自动血液分析仪确认、验证和质量保证》体液检查标准化文件

国外:CLSI-IFCCC49-A

Analysisofbodyfluidsinclinicalchemistry,approvedguideline()

国外:CLSI-IFCCH56-A

Bodyfluidanalysisforcellular







































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